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HaCaT細(xì)胞,人永生化表皮細(xì)胞形態(tài)
產(chǎn)品名稱:HaCaT細(xì)胞
中文名稱:人永生化表皮細(xì)胞
來源:人皮膚
類別:類屬于正常細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài):上皮樣
生長狀態(tài):貼壁生長
培養(yǎng)基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO2
消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液,消化 5-10min
主營細(xì)胞:DC2.4細(xì)胞,HOS細(xì)胞,3D4/21細(xì)胞,HCAEC細(xì)胞,Tca-8113細(xì)胞,NCI-H460細(xì)胞,MCF-7細(xì)胞,U251細(xì)胞
消化比例:1:4-1:10
換液時間:2-3 天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS,5% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
主營細(xì)胞:CNE細(xì)胞,MADB-106細(xì)胞,Sf9細(xì)胞,HOC細(xì)胞,3T3-L1細(xì)胞,THP-1細(xì)胞。
若客戶收到2ml小管HaCaT細(xì)胞,人永生化表皮細(xì)胞形態(tài)
收到細(xì)胞以后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶,加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度:若未超過80%匯合度,換液繼續(xù)培養(yǎng),根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度,可直接進行傳代(細(xì)胞貼壁處理方法)。
1、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運輸?shù)霓k法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作。
2、鏡下觀察:將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中,留待日后培養(yǎng)用,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,按要求比例消化傳代。(收到細(xì)胞,建議棄去原基培養(yǎng),使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng))
3、消化方法:
1、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中,留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。(收到細(xì)胞,建議棄去原基培養(yǎng),使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng))
2、T25瓶加3ml PBS,洗一次,棄上清,再加1ml消化液消化,顯微鏡下觀察,等細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個后,加培養(yǎng)基混勻,離心收集,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6, 1:6-1:8),每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。
慧穎生物購買HaCaT細(xì)胞,人永生化表皮細(xì)胞形態(tài)注意事項:
1、客戶在收到細(xì)胞時,請首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否外滲,培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問題,請在收到細(xì)胞后立即與我們 王。
2、由于運輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請離心收集,重懸細(xì)胞,置培養(yǎng)箱培養(yǎng),細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。
3、收到細(xì)胞時如無異常情況,請按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞。
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