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C6細(xì)胞大鼠腦膠質(zhì)瘤 操作說(shuō)明

發(fā)布時(shí)間:2016-02-16瀏覽:1904次

C6細(xì)胞大鼠腦膠質(zhì)瘤 操作說(shuō)明

C6細(xì)胞簡(jiǎn)介:

產(chǎn)品名稱:C6細(xì)胞

中文名稱:大鼠腦膠質(zhì)瘤

來(lái)源:大鼠腦 膠質(zhì)瘤細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)基:DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2

消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA 溶液,消化 5-10min

傳代比例:1:2-1:3

換液時(shí)間:2-3 天換液一次

凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存

C6細(xì)胞大鼠腦膠質(zhì)瘤 操作說(shuō)明

懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

 

貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞的傳代:吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細(xì)胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細(xì)胞開始脫落時(shí),倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細(xì)胞。也可以待細(xì)胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞。1:3或1:5稀釋細(xì)胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

2)細(xì)胞株的凍存:

1. 取培養(yǎng)2~3天生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞,用細(xì)胞培養(yǎng)液將細(xì)胞配成2×106~2×107/ml。

2. 在1ml細(xì)胞凍存管中加入0.5ml細(xì)胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時(shí),-20℃ 2小時(shí),然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。

3)細(xì)胞株的復(fù)蘇:復(fù)蘇時(shí),從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細(xì)胞。將細(xì)胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞待細(xì)胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細(xì)胞則培養(yǎng)2~3小時(shí),待細(xì)胞帖壁后,倒去培養(yǎng)液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后,500×g離心5分鐘,去上清液,加入新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

素爾生物一站式血清采購(gòu)商城,供應(yīng)各類品牌胎牛血清,主要品牌:SERANA、BOVOGEN、Hyclone、Gibco、PAA、Sigma、BI等.

以Hyclone為例,主要供應(yīng)的血清主要有:

SV30087.02  500ML   南美源  適合一般細(xì)胞,普通腫瘤細(xì)胞

SH30084.03  500ML   澳洲源  適合嬌貴細(xì)胞的培養(yǎng)

SH30396.03  500ML   加拿大  適合嬌貴細(xì)胞的培養(yǎng)

SH30070.03  500ML   北美    適合嬌貴及干細(xì)胞

SH30071.03  500ML   北美    優(yōu)等級(jí)別

SH30370.03  500ML   北美    標(biāo)準(zhǔn)型

SH30406.02  500ML   新西蘭  適合一般細(xì)胞,普通腫瘤細(xì)胞

SH30406.02M 500ML   新西蘭  干細(xì)胞

SH30084.03M 500ML   澳洲源  干細(xì)胞

SH30406.02E 500ML   新西蘭  胚胎干細(xì)胞

SH30084.03E 500ML   澳洲源  胚胎干細(xì)胞

SH30070.03E (帶紅色標(biāo)簽)  500ML   北美    干細(xì)胞

SH30068.03  500ML   美國(guó)    碳吸附血清

SH30068.03HI    500ML   美國(guó)    碳吸附,滅活

SH30118.03  500ML   北美    新生牛

SH30074.03  500ML   美國(guó)    馬血清

SH30074.03HI    500ML   美國(guó)    熱滅活馬血清

 

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