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細胞計數(shù)
原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數(shù)目即可換算出每mL細胞懸液中的細胞數(shù)量。
操作步驟:
1. 將計數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計數(shù)板上。
2. 輕輕吹打細胞懸液,使細胞均勻分布。吸出少許細胞懸液滴在細胞入口,使細胞懸液充滿蓋玻片和計數(shù)板之間,靜置1~2min,使細胞沉降。注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細胞懸液進入旁邊的槽中。
3. 在顯微鏡下對A/B/C/D四個大格內(nèi)的細胞進行計數(shù),壓在大格四周邊線上的細胞只計數(shù)壓在2條邊線上的細胞(如右側(cè)和下方)。若鏡下有2個細胞組成的細胞團,則應按單個細胞計算;若細胞團數(shù)量較多,占細胞總量的10%左右,則說明細胞分散不好會導致計算不準確,需要重新制備細胞懸液。
4. 按公式計數(shù)細胞數(shù)量 細胞數(shù)/mL=四個大格內(nèi)細胞總數(shù)×104/4
(每一個大格的體積為長1mm×寬1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000 mm3,因此計算時需×104)
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