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小鼠ELISA試劑盒是基于標準的雙抗夾心酶聯(lián)免疫分析技術(shù)。將小鼠E選擇素特體包被96孔小鼠E選擇素檢測抗體為生物素標記抗體試驗樣品和生物標記的檢測抗相繼加入到96孔中,然后洗滌平板。生物素-HRP加入96孔中,未與生物素標檢測抗體結(jié)合的,被洗滌緩沖液洗掉HRP的底物TMB可與HRP(辣根過氧化物酶)發(fā)生酶促反應。TMB被HRP催化后變成藍色物質(zhì),在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃顏色的深淺與小鼠E選擇素樣品被捕獲的量成正比。
酶聯(lián)免疫測定方法是以抗原抗體間的特異反應為基礎(chǔ)的,其與生化的化學反應有著本質(zhì)的區(qū)別,并且因為標記物猶如位素、酶、熒光素、微量元素、發(fā)光物質(zhì)等的摻人,酶聯(lián)免疫測定技術(shù)從低敏捷的免疫沉淀和免疫凝集反應進入到了高敏捷的放射免疫、酶免疫、熒光免疫和發(fā)光免疫測定時代,可見酶聯(lián)免疫測定更多的是用于生物活性物質(zhì)的微量測定。
從理論上說,一種生物或生理活性物質(zhì),只要有辦法得到其特異的抗體,就可以建立這種物質(zhì)的酶聯(lián)免疫測定方法。而在血站,HBsAg,抗HCV,抗HIV和梅毒抗體等標志物的檢測,哪怕是1%的錯誤,對將要接受輸血的特定患者來說,就是100%的災害??梢?,酶聯(lián)免疫測定的質(zhì)量控制有多么重要。近期,在電視、報紙等新聞媒體中,??梢姷揭恍┯嘘P(guān)醫(yī)患糾紛的報道,其中一些就與酶聯(lián)免疫測定有關(guān),如輸血后丙肝病毒、艾滋病毒感染的發(fā)生,性病檢測的假陽性等。在以前看來一些難以進行質(zhì)量測定的微量生物活性物質(zhì),如受體、細胞因子以及酶等均可使用酶聯(lián)免疫測定技術(shù)來測定。
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